鸡IL-18真核表达载体的构建及其对新城疫疫苗免疫增强作用的研究

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中文摘要：应用RT-PCR技术,在国内首次从鸡新城疫I系疫苗接种的鸡胚脾细胞中扩增出全长594bp、编码198个氨基酸的鸡IL-18全基因,并将该基因定向克隆至pcDNA3载体上构建了鸡IL-18真核表达载体(pcDNA<,3>-IL18),进而观察了其对新城疫疫苗的免疫增强作用.结果表明,同时接种pcDNA<,3>-IL18质粒和ND Ⅳ系活疫苗的免疫鸡在接种后35天内,特别是15天之后所产生的HI抗体效价、T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖反应均高于单纯Ⅳ系活疫苗免疫组及pcDNA3空白质粒和Ⅳ系活疫苗联合免疫组鸡.其中,HI抗体效价在15天时差异显著(P<0.05),在30和35天时差异极显著(P<0.01);T淋巴细胞增殖反应在15天后均表现为差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);B淋巴细胞增殖反应仅在15天时差异显著(P<0.05);而单纯Ⅳ系活疫苗免疫组与pcDNA3空白质粒和Ⅳ系活疫苗联合免疫组之间的各测定指标则无明显的差异(P>0.05).在35天时进行攻毒,联合免疫组的保护率为83.3﹪,而单纯疫苗免疫组及pcDNA<,3>空白质粒和疫苗联合免疫组鸡的保护率则分别只有61.5﹪和66.7﹪.结果说明,本试验中pcDNA<,3>-IL18真核表达质粒在鸡体内得到了表达,表达产物不仅能够显著增强新城疫疫苗所诱导的细胞免疫和体液免疫反应,而且还可以明显提高疫苗的保护率.本研究是国内首次完成的鸡IL-18全基因的克隆、序列分析、真核表达质粒的构建及其新城疫疫苗免疫增强作用的研究,为进一步探讨IL-18基因的结构功能、表达及表达产物的应用奠定了良好的基础.

作者：

张春杰、赵德明、李银聚、吴庭才、程相朝、郑祥海

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作者单位：

河南科技大学动物科技学院(洛阳)

中国农业大学动物医学院(北京)

关键词：

鸡 IL-18 真核表达载体免疫增强作用新城疫疫苗

主办单位：

中国畜牧兽医学会

会议名称：

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

会议时间：

2004-09-01

会议地点：

贵阳

会议母体文献：

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会论文集

页码：

125-133

出版时间：

2004