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玻璃化冷冻牛卵母细胞支持体细胞克隆胚的体内外发育研究

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用SDFS30,EDFS40和EDFSF30,EDFSF40玻璃化冷冻液,对牛体外成熟培养16h的卵母细胞实施OPS法冷冻保存,冷冻解冻后卵母细胞的形态正常分别为77.0﹪和79.1﹪及97.2﹪和97.5﹪,再经2h的成熟培养,EDFSF30和EDFSF40组的成熟率分别为76.0﹪和73.1﹪,利用A23187和6-DMAP联合化学激活后其囊胚发育率达17.7~22.5﹪,与对照组(33.3﹪)差异不显著(P>0.05),并用其进行体细胞克隆牛的制备,共操作卵细胞722枚,融合343枚(47.5﹪),经过7天培养后有56枚(16.3﹪)重构胚发育至囊胚,其中24枚胚胎移植后6头同期处理的受体母牛,计2头妊娠(33.3﹪),流产1头.另一头于妊娠263天分娩.结果表明用玻璃化冷冻解冻的牛卵母细胞可以体细胞克隆胚胎的体内外全程发育.

侯云鹏、戴蕴平、朱士恩、朱化彬、吴通义、李宁

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