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缺氧条件下大鼠单核细胞Raf-1、NF-κB活性与TNF-α表达变化规律的研究

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目的:研究缺氧培养的大鼠外周血单核细胞(PBMCs)Raf-1、核转录因子κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化规律,探讨缺氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,为进一步研究多器官功能障碍综合征(MODS)的肺启动机制奠定基础. 方法:采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,分为Forskolin+缺氧组和单纯缺氧组.Forskolin+缺氧组细胞在缺氧前予50μMForskolin预处理.两实验组均于低氧条件下(3％O2,5％CO2,92％N2)培养0、1、3、6、9、12、24h后,收集细胞及培养液上清,分别采用Raf活性检测试剂盒、电泳迁移分析法(EMSA)、逆转录PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Raf-1、NF-κB活性及TNF-α表达量. 结果:缺氧1～9h,Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量显著高于正常对照组.缺氧后1～24h,Raf-1活性、NF-κB结合活性与TNF-αmRNA和蛋白表达水平间呈显著正相关.经10μmForskolin预处理后,缺氧1～9h,Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量与正常对照组无显著差异. 结论:缺氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的Raf-1活性及NF-κB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子TNF-α,这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关.

徐智、吴国明、钱桂生、王兴胜、陈维中、李淑平、薛桥、王士雯

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缺氧 核转录因子 肿瘤坏死因子 全身炎症反应综合征 呼吸窘迫综合征

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