猪胰岛素样生长因子-ⅠmRNA实时荧光定量PCR定量标准的构建

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中文摘要：本文采用RT-PCR的方法利用肝组织提取的总RNA制备猪胰岛素样生长因子Ⅰ(pIGF-Ⅰ)cDNA目的片断,与pMD-18T vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.联合应用PCR鉴定、a互补法、限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备实时荧光定量PCR(FQ-PCR)梯度浓度参考标准.结果表明:pIGF-Ⅰ cDNA目的片断成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片断序列的特异性和完整性,成功构建了pIGF-Ⅰ实时FQ-PCR的定量参考标准.

作者：

肖书奇、戴立胜、张树敏、赵中利、孙玉成、高妍、李毅、赵志辉、张嘉保

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作者单位：

吉林大学实验动物中心

吉林省农业科学院

吉林大学畜牧兽医学院

关键词：

猪胰岛素样生长因子Ⅰ 参考标准 RT-PCR技术

主办单位：

中国畜牧兽医学会

会议名称：

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

会议时间：

2006-07-01

会议地点：

河北保定

会议母体文献：

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会论文集

页码：

97-101

出版时间：

2006