本文以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RNA;经磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质粒载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测文库容量达106以上,重组率为88.21％;测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为今后进一步研究奠定了很好的物质和技术基础.
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