一个高抗草苷膦新基因的克隆

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中文摘要：从被草苷膦极度污染的土壤中分离到一株极端抗草苷膦菌HTG7,经16s rDNA鉴定其为可变盐单胞菌(Halomonas varabilis).它能在强碱、高盐的环境下或草苷膦浓度为200mmol/L至450mmol/L的MOPs液体培养基中都能正常生长.从该菌的Super Cos1 Cosmid粘粒基因组文库中克隆到一个草苷膦抗性的DNA片段,该片段转化草苷膦敏感菌株JM109后,使受体菌获得高抗草苷膦特性,能在草苷膦浓度为80mmol/L的MOPs液体培养基中良好生长.功能互补试验表明,该基因能恢复EPSP合成酶缺陷型菌株E.coli ER2799在限制性培养基中的生长能力,证明该基因具有编码完整的EPSP合成酶的功能.序列分析结果表明,基因全长1350个碱基对,包含一个完整的阅读框架,核苷酸序列与目前已报导的编码EPSP合成酶的aro A基因几乎没有任何同源性.由450个氨基酸组成的氨基酸序列与草苷膦抗性相关的美国专利所涉及的11种微生物EPSP合成酶的同源性在45﹪以下.表明我们所克隆的是一个结构新颖、功能明确并高抗草苷膦的新基因.

作者：

刘柱、徐玉泉、张维、刘光全、平淑珍、陈明、陆伟、杨志荣、林敏

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作者单位：

中国农业科学院生物技术研究所(北京)

关键词：

草苷膦抗性可变盐单胞菌 EPSP合成酶 aro A基因编码基因

主办单位：

中国微生物学会

会议名称：

中国微生物学会第九届微生物学教学和科研及成果产业化研讨会

会议时间：

2003-11-01

会议地点：

长沙

会议母体文献：

中国微生物学会第九届微生物学教学和科研及成果产业化研讨会论文汇编

页码：

78-81

出版时间：

2003