猪圆环病毒Ⅱ型GD株ORF1基因重组腺病毒的构建及其表达

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中文摘要：根据PCV2ORF1基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF1基因(945bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF1.将PCV2ORF1基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ORF1,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV-ORF1,然后用PacI线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒.通过荧光显微镜观察、PCR检测和Westernblot检测证明PCV2ORF1基因在293细胞内获得表达,ORF1多肽具有一定的免疫原性。

作者：

祝卫国、西北农林科技大学动物科技学院、宋长绪、王贵平、杨增歧、王旭荣、黄忠、张春红

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作者单位：

广东省农科院兽医研究所,广州,广东,510640

杨凌,陕西,712100

西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,陕西,712100

关键词：

猪圆环病毒2型 ORF1基因重组腺病毒基因表达免疫原性 PCR检测

主办单位：

中国畜牧兽医学会

会议名称：

中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

会议时间：

2005-05-21

会议地点：

济南

会议母体文献：

2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集

页码：

450-453

出版时间：

2005