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核酸识别快速检测水泡性口炎病毒和定型的研究

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以水泡性口炎病毒(VSV)的L基因为模板,应用半套式(semi-nested)聚合酶链反应(PCR)技术,设计一对外侧引物及一条半套式引物,对细胞培养物和人工感染豚鼠足部水泡液和不同时期的血液进行检测.设立细胞阴性对照和空白对照,同时用相关和相似病毒FMDV,BEFV和BTV等病毒作扩增比较.扩增产物经电泳分析结果表明,其大小与设计的引物间的序列大小基本一致,外侧引物扩增出243 bp片段,半套式引物扩增出135 bp片段,所有对照扩增呈阴性.对扩增物经序列分析,与VSV L基因的把序列完全一致.对各种样品的检测均可在6 h内完成.证实该方法是特异、敏感、安全、快速,并能进行VSV毒型鉴定的检测技术.

花群义、徐自忠、张念祖、金宁一、周晓黎、董俊、杨云庆

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云南出入境检验检疫局,650228

农业部热带亚热带动物病毒病重点实验室,昆明,650224

中国人民解放军军需大学,长春,130062

水泡性口炎病毒 聚合酶链反应 核酸识别 毒型鉴定

国家自然科学基金委员会

军事医学科学院

第七届海内外生命科学论坛

2002-05-28

北京

第七届海内外生命科学论坛

143-148

2002