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Asia 1型口蹄疫病毒VP1多表位基因的串联、表达及ELISA诊断方法的建立

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首先合成Asia 1型口蹄疫病毒两个流行株VP1基因的五个抗原表位,并克隆到pMD18-T载体上,再按设计的酶切位点连接,构建出Asia 1型VP1双拷贝基因片段(VP1Asia)。然后,将VP1Asia基因连接到原核表达载体上pET-28a(+),构建了重组表达质粒pET28a-VP1Asia,转入BL21菌中进行原核表达。再用包涵体及切胶纯化等方法对表达的目的蛋白进行纯化,以纯化的蛋白作为抗原检测牛Asia Ⅰ型口蹄疫阳性血清.试验结果表明VP1Asia基因在大肠杆菌中获得高效表达,并获得了高纯度的VP1Asia蛋白,以纯化的VP1Asia蛋白作为检测抗原建立了检测Asia 1型口蹄疫病毒抗体的ELISA诊断方法,为组装ELISA诊断试剂盒奠定了基础。

鲁会军、金宁一、郑敏、韩松、霍晓伟、李昌、金扩世

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军事医学科学院军事兽医研究所基因工程实验室,吉林,长春,130062

口蹄疫 Asia1型 VP1Asia 基因克隆 基因表达 诊断方法

中国畜牧兽医学会

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

2007-09-20

江西井冈山

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

179-182

2007