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蓝藻PEPC在大肠杆菌中的表达对脂类合成的调控
侯李君 1宋东辉 1施定基 1中国科学院植物研究所2
作者信息
- 1. 天津科技大学海洋科学与工程学院,天津,300457
- 2. 北京,100093
- 折叠
摘要
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC(EC 4.1.1.31)是控制生物体内蛋白质和脂肪酸含量比例的关键酶.本研究目的在于研究PEPC的表达对大肠杆菌Escherichia coli(E.coli)中脂类合成的调控.PCR法扩增了念珠藻Nostoc sp PCC 7120 PEPC基因中含保守结构域的一段序列pepc,并将其克隆到pMD18-T载体上。将pepc基因片段正反向连接到穿梭表达载体pRL-489上BamHI位点之间,构建得带有pepc正反义基因的载体pRL-Sen pepc、pRL-Anti pepc,转化入大肠杆菌DH5a宿主细胞中.测定了转正反义基因菌株的PEPC活性,总蛋白和总脂.结果表明:PEPC在大肠杆菌中的表达直接影响着PEPC的活性和脂类的合成:PEPC的正向表达提高了PEPC的活性,抑制了脂类的合成；PEPC的反向表达减弱了PEPC的活性(69.8％),脂类合成增加(49.6％)。
关键词
蓝藻PEPC/大肠杆菌/磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶/反义表达/脂类合成引用本文复制引用
主办单位
中国化工学会会议名称
2007年工业生物技术研发及生产生物质能和生物基化学品技术交流与发展研讨会会议时间
2007-10-01会议地点
南京会议母体文献
2007年工业生物技术研发及生产生物质能和生物基化学品技术交流与发展页码
120-126出版时间
2007