采集安徽感染PVY的烟草病样,Trizol法提取总RNA,根据PVY HC-Pro基因两侧的保守序列设计特异性引物HC/F1、HC/R1和HC/F、HC/R, RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并测序。PVY HC-Pro-4全长1359bp,编码453个氨基酸,与Potato virus Y strain N (AM268435) HC-Pro基因的核苷酸序列相似性最高,达99.0﹪。构建PVY HC-Pro-4与其他14个PVY HC-Pro基因的系统关系树,可以看出PVY HC-Pro-4与Potato virus Y strain N (AM268435)的亲缘关系最近。HC-Pro的克隆为进一步研究蚜虫传毒机制以及抗病毒基因工程奠定了基础。
NETL
