小鼠畸胎瘤细胞P19CL6向心肌细胞分化的蛋白质组学研

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中文摘要：P19CL6细胞是小鼠胚胎性癌细胞P19衍生的细胞系，用含1％DMSO的培养基培养时，该细胞能高效的分化成搏动的心肌细胞，P19CL6细胞是体外研究心肌细胞分化的良好模型。在本研究中，我们用蛋白质组学的方法寻找P19CL6细胞向心肌细胞分化前后差异表达的蛋白。在DMSO诱导后，我们发现细胞内开始表达肌小节肌球蛋白重链(MHCs)以及3种心肌特异性的转录因子(Csx/Nkx-2.5,GATA-4和MEF2C)，这意味着P19CL6细胞能已经分化成为真正的心肌细胞。利用双向电泳、银染、图像分析的方法，我们初步探索了在该分化过程中存在明显改变的差异蛋白。结果发现了17个差异表达的蛋白点，经过MALDI-TOF-MS和ESI-MS/MS的质谱分析，我们最终鉴定出16个差异表达的蛋白点。对这些差异蛋白的分析结果表明，它们在分化过程中与能量代谢、信号传导、细胞骨架形成等有关。为了验证分化过程中这些蛋白的表达变化，我们用realtime-PCR的方法对其中6种已知蛋白mRNA水平进行了检测。结果其中只有3个基因的mRNA水平和蛋白水平的丰度一致。此次对P19CL6细胞向心肌细胞分化前后差异表达蛋白的初步探索,可以为我们深入研究DMSO诱导P19CL6细胞向心肌细胞定向分化的调控机制提供线索。

作者：

晁腾飞、陈涛、袁建刚、强伯勤、彭小忠

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作者单位：

中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

关键词：

心肌细胞分化蛋白质组畸胎瘤细胞 P19CL6细胞质谱蛋白表达

主办单位：

中国生物工程学会

北京生物工程学会

会议名称：

2007生命科学领域青年科学家年会暨第五届北京生命科学领域联合年会

会议时间：

2007-04-01

会议地点：

北京

会议母体文献：

2007生命科学领域青年科学家年会论文汇编暨第五届北京生命科学领域联合年会论文汇编

页码：

出版时间：

2007