应用SMART技术构建甘蔗叶片cDNA全长文库

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中文摘要：以甘蔗(Saccharum officinarum Linn)为材料,利用SMART技术构建甘蔗全长cDNA文库,从甘蔗中提取总RNA和分离mRNA,用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链,通过长距离PCR扩增得到足量的双链cDNA,同时比较了不同双链cDNA与载体的连接效率和转化效率分析.结果表明,所构建的甘蔗叶片cDNA文库库容和重组百分比分别是1.8×106个克隆和98.6%,插入片段长度主要集中在0.6~2.5kb,平均插入片段长度约为1.2 kb.本研究为国内首次报道甘蔗全长cDNA文库,所构建的文库拥有较好的质量,为项目组克隆目标性状全长基因克隆提供了平台.

作者：

张积森、黄金存、叶冰莹、陈由强、陈如凯

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作者单位：

福建师范大学生命科学学院,福州,350108 农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福州,350002

福建师范大学生命科学学院,福州,350108

农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福州,350002

关键词：

甘蔗基因克隆 cDNA全长文库 SMART技术

主办单位：

中国作物学会

会议名称：

中国作物学会甘蔗专业委员会第十三次学术讨论会

会议时间：

2008-08-01

会议地点：

昆明

会议母体文献：

中国作物学会甘蔗专业委员会第十三次学术讨论会论文集

页码：

88-95

出版时间：

2008