牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌J9株Fnbp配基结合区基因的原核表达及其免疫原性

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中文摘要：PCR扩增牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌J9株纤粘蛋白结合蛋白(Fnhp)配基结合区基因，纯化后的扩增产物克隆到表达载体pET-28a(+)构建重组表达质粒pET-28a-Fnb，酶切鉴定和测序证明重组质粒构建成功。将pET-28a-Fnb转化大肠杆菌BL21经诱导表达得到重组蛋白，westernblot分析证实该蛋白具有良好的免疫学活性。重组蛋白分别与弗氏佐剂、白油佐剂、Seppic佐剂乳化后制备亚单位疫苗，间隔2周共3次腹腔注射免疫小鼠。选取三免后血清抗体效价最高的免疫组血清和小鼠分别进行粘附实验、中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒实验。结果：三种不同佐剂重组蛋白免疫组中白油佐剂组小鼠血清抗体效价显著高于弗氏佐剂组和Seppic佐剂组(P＜0.01)。与对照组相比，重组蛋白免疫组小鼠血清粘附能力和调理中性粒细吞噬能力显著增强(P＜0.05)。攻毒后24h重组蛋白免疫组小鼠乳腺金黄色葡萄球菌cFU显著低于对照组(P＜0.05)。研究结果表明重组Fnbp配基结合区蛋白有良好的生物学活性和免疫原性，可以作为奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎候选亚单位疫苗。

作者：

胡长敏、龚瑞、郑露、郭爱珍

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作者单位：

华中农业大学动物医学院，武汉 430070

关键词：

乳腺炎金黄色葡萄球菌 Fnbp配基结合区免疫原性

主办单位：

中国畜牧兽医学会

会议名称：

中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会暨中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会

会议时间：

2009-08-18

会议地点：

呼和浩特

会议母体文献：

中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会暨中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会论文集

页码：

218-225

出版时间：

2009