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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用分析

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核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein)是猪繁殖与呼吸综合征病毒((Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome.PRRS))的最主要的结构蛋白,在病毒粒子的包装中起着重要作用,但是对于病毒感染性所必需的N蛋白的最小结构域还不确定。本研究在本实验室所拥有的感染性克隆的基础上,构建了N蛋白末端系列缺失的突变体,通过转染Marc-145细胞,观察细胞病变,检测基因组的复制、亚基因组的转录,表明N蛋白C端可以承受4个氨基酸的缺失而不影响病毒的感染性。 值得说明的是N蛋白C端所有缺失突变体转染细胞后拯救出的病毒都发生了额外的突变,包括点突变和缺失。其中C端缺失3个氨基酸的突变体拯救病毒经空斑纯化后出现了5种形式的病毒,包括两种额外缺失和三种额外的点突变。C端缺失4个氨基酸的突变体拯救病毒也发生了额外的点突变。C端缺失5个氨基酸的突变体转染细胞后没有拯救出活的病毒,但可以检测到亚基因组的转录,说明可能影响了病毒粒子的包装。这些拯救病毒都可以在细胞上至少稳定传5代,从而为缺失疫苗的研究奠定基础。

谭菲菲、韦祖樟、孙志、庄金山、袁世山

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中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室 上海 200232

猪繁殖与呼吸综合征病毒 核衣壳蛋白 病毒复制 点突变体 Marc-145细胞

中国畜牧兽医学会

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

2009-09-01

南宁

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会论文集

384-386

2009