摘要
目的:应用基因芯片技术,分析甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中基因表达谱的变化。 方法:用GMA对16HBE细胞进行染毒,采用刀豆凝集素A凝集实验、锚着非依赖性实验对染毒细胞的恶性转化性状进行检测。分别提取不同代龄染毒细胞和对照组细胞的总RNA,选用人类全基因组表达谱芯片,对染毒细胞的基因表达谱进行分析。 结果:GMA对16HBE细胞染毒后,第十代细胞可在conA溶液中形成少量细胞团,但不能在软琼脂中形成集落:而第三十代细胞对conA的凝集敏感性增加,发生细胞凝集现象,且可在软琼脂中形成细胞集落,提示其获得恶性细胞的生物学特性。转化前期细胞筛选出3667个基因表达显示出明显差异,其中包括2975个上调基因和692个下调基因;转化细胞筛选出1789个基因表达显示出明显差异,其中包括719个上调基因和1070个下调基因。有283个基因在转化前期细胞和转化细胞中均与对照细胞相比呈差异表达:231个基因在转化前期细胞和转化细胞中表达差异一致,其中88个基因在转化前期细胞和转化细胞中均呈上调表达,143个基因在转化前期细胞和转化细胞中均呈下调表达;另外52个基因中有48个基因在转化前期细胞中表达上调而在转化细胞中表达下调,4个基因在转化前期细胞中表达下调而在转化细胞中表达上调。 结论:从GMA致16HBE细胞恶性转化过程的基因表达谱中,筛选出一批表达差异基因,有助于GMA致16HBE细胞恶性转化机制的阐明,并为后续的研究奠定基础。