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实验免RAPD反应体系的优化及引物筛选

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目的:建立实验兔随机扩增多态DNA(RAPD)的最优反应体系,并对RAPD引物进行筛选优化。方法:以白毛黑眼(WHBE)兔,日本大耳白(JW)兔,新西兰(NZ)兔为实验材料,对影响RAPD反应的各因素进行优化,摸索出最佳的Mg2+,dNTP,Taq酶,引物和2DNA模板的浓度,并从60个随机引物中筛选出适合实验兔RAPD反应的引物。结果:最优的RAPD-PCR反应体系:在20μl的反应体系中,Mg2+1.5mM,dNTP0.25mM,Taq酶1.25U,引物5μM,模板DNA40ng。60个RAPD引物中剔除了重复性差,条带模糊的引物后,有25个引物稳定,扩增出来的条带清晰、多态性高。

余佳、蔡月琴、肖慧、陈民利

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浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州 310053

实验动物 RAPD反应 体系优化 引物筛选

中国实验动物学会

第五届中国中医药实验动物科技交流会

2009-08-24

上海

第五届中国中医药实验动物科技交流会论文集

p.40-44

2009