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牛型布氏杆菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及免疫原性检测

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根据已发表的牛型布氏杆菌外膜蛋白OMP2b基因的核苷酸序列,设计一对特异性的引物,以牛型布氏杆菌A19株基因组为模板,通过PCR扩增出OMP2b全长,将OMP2b经T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,OMP2b全长1128bp,编码376个氨基酸。将OMP2b定向克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-OMP2b,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达融合蛋白His-OMP2b。SDS-PAGE结果显示,His-OMP2b约为89kD,与预期大小一致,表明His-OMP2b表达成功。Western Blot检测结果表明,His-OMP2b能与牛布氏杆菌A19全菌兔抗血清发生特异性反应,表明His-OMP2b具有免疫原性,为进一步研究OMF2b的免疫学功能奠定基础。

何亮、韩先干、胡青海、丁铲、于圣青

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中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241

牛布氏杆菌 蛋白表达 免疫原性 核苷酸序列 大肠杆菌

中国畜牧兽医学会

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

2010-05-01

南京

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集

494-498

2010