牛乳腺炎无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因抗原表位的高效表达及其免疫活性鉴定

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中文摘要：本研究根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌SIP基冈序列抗原表位序列设计1对引物，以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板，PCR扩增出SIP抗原表位序列。对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及免疫活性鉴定。结果显示克隆的SIP基因抗原表位序列为897bp，编码299个氨基酸，与GenBank中公布的牛无乳链球菌SIP基因(AF151361)相似性为99.8%，氨基酸相似性为99.7%。经诱导后得到了可溶性高效表达，可溶性表达率达到48.7%，重组蛋白的分子量为40.3ku。经Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在90%以上的SIP蛋白，经Western-blot分析表明SIP蛋白显示出较强的免疫反应性。该项目研究为进一步研究奶牛乳腺炎无乳链球菌新型免疫抗原制剂，建立监测奶牛隐性乳腺炎抗体方法与乳中无乳链球菌的检测方法奠定了研究基础。

作者：

郎景民、布日额、刘娣、吴金花、锡林高娃、刘燕

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作者单位：

内蒙古民族大学生命科学,通辽028043 内蒙古民族大学动物科技学院,通辽 028043

内蒙古民族大学生命科学,通辽028043 黑龙江省农业科学院,哈尔滨 150000 内蒙古民族大学动物科技学院,通辽 028043

黑龙江省农业科学院,哈尔滨 150000

内蒙古民族大学生命科学,通辽028043

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关键词：

牛乳腺炎无乳链球菌 SIP基因原核表达免疫活性检测方法

主办单位：

中国畜牧兽医学会

会议名称：

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

会议时间：

2010-05-01

会议地点：

南京

会议母体文献：

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集

页码：

502-508

出版时间：

2010