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喹烯酮致HepG2细胞DNA损伤效应的研究

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目的:喹烯酮(Quinocctonc)是一种新型喹嗯啉类药物,我国于2003年8月正式批准其作为动物抗菌促生长剂在动物饲料中添加使用。截至目前,关于喹烯酮是否具有遗传毒性尚未有定论。本研究旨在应用人肝癌细胞系(HcpG2)细胞,通过彗星实验,RAPD分析以及Long-PCR方法对喹烯酮药物诱导的DNA损伤进行检测,为评价药物的遗传毒性提供科学依据,完善喹烯酮药物的使用安全评价。 方法:应用NTT实验筛选适宜药物浓度,彗星实验(7.5,15和30μg/ml)检测单细胞水平DNA链断裂损伤,RAPD分析(1.25,2.5和5μg/ml)检测基因组水平DNA损伤,Long-PCR方法检测线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)扩增抑制和DNA损伤情况。 结果:喹烯酮诱导HepG2细胞DNA断裂损伤,尾长(μm)、尾距(μm)和尾部DNA含量(%)参数指标与药物剂量呈剂量依赖性正相关且具有差异显著性(p<O.05)。RAPD分析图谱显示条带出现或缺失以及条带亮度改变,表明喹烯酮诱导HepG2细胞基因组DNA损伤。喹烯酮致HepG2细胞nDNA和mtDNA出现剂量依赖性损伤,相对扩增比例与药物剂量呈负相关,损伤频率和药物剂量呈正相关,相同剂量组mtDNA的损伤频率高于nDAN,此结果说明喹烯酮诱导的mtDNA损伤较nDNA损伤更为严重。 结论:研究表明喹烯酮是诱导HepG2细胞DNA损伤阳性物,应谨慎作为动物饲料添加剂使用。

靳溪、陈倩、邹家杰、陈开跑、张婷、刘风英、汤树生、肖希龙

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中国农业大学动物医学院,北京,100193

喹烯酮 饲料添加 肝癌细胞系 HepG2细胞 DNA损伤 彗星实验 RAPD分析

中国环境诱变剂学会

中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议

2009-07-10

哈尔滨

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125-130

2009