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分枝杆菌噬菌体D29快速检测牛分枝杆菌的研究

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建立牛分枝杆菌噬菌体快速检测技术,探讨最佳的检测条件,并将建立的方法用于牛分枝杆菌及20种常见分枝杆菌和6种非分枝杆菌的检测。结果表明,噬菌体工作浓度为1×108PRU/ml、37℃感染2h为最佳检测条件。杀毒剂浓度在100mmol/L,室温作用10min即可完全杀灭受试噬菌体。选择浓度为4mg/ml的对数生长期指示细菌为工作浓度,获得理想的检测结果。加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染。牛分枝杆菌和耻垢分枝杆菌检测结果为阳性,16种常见分枝杆菌和6种非分枝杆菌检测结果均为阴性,4种NTM(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>105条/ml)检测结果为阳性。该法可检测出60~120条/ml牛分枝杆菌。重复性试验表明,批内、批间变异系数均小于15%,重复性良好。该法检测牛分枝杆菌具有快速、经济、易操作等特点,但测定条件的选择非常重要。

钟志军、彭广能、白永平、王洁、秦莲花、杨华、胡忠义

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四川农业大学动物科技学院 雅安 625014 上海市肺科医院,上海市结核重点实验室 上海 200433

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分枝杆菌噬菌体 牛分枝杆菌 诊断技术

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