首页|氯丙嗪对大鼠卵巢颗粒细胞损伤作用的研究

氯丙嗪对大鼠卵巢颗粒细胞损伤作用的研究

扫码查看
原文链接
  • NETL
目的：通过氯丙嗪染毒体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞，研究其对卵巢颗粒细胞的毒性作用，并初步探讨可能的作用机制。 方法：对未成熟的wistar大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养，在初步确定氯丙嗪作用于颗粒细胞IC50值为4.36×10-5 mol/L的基础之上，设置了对照组和高、中、低三个浓度梯度的氯丙嗪染毒组，剂量分另4为0、0.1、1、10μM，染毒24h.染毒结束后采用MTT法检测细胞相对活力，ELISA法检测收集培养液中孕酮(P)和雌二醇(E2)的含量，DNA荧光染料Hoechst 33258检测颗粒细胞的凋亡变化，半定量RT—PCR检测凋亡调控基因Bax，Bcl-2和P53 mRNA以及激素分泌相关调控基因FSHR、StAR、P450scc和P450arommRNA的表达，免疫细胞化学染色法检测颗粒细胞中特异性受体卵泡刺激素受体(FSHR)的表达。 结果：在本次实验所设置的剂量范围内，与对照组比较，氯丙嗪能明显地抑制大鼠卵巢颗粒细胞增殖和E2的分泌(p<0.05)，促进颗粒细胞凋亡(p<0.01)，呈浓度依赖关系，而低剂量的氯丙嗪却在一定程度上能够促进孕酮的分泌(p<0.05)，但是随着剂量(1μM～10μM)的升高，P的分泌量与低剂量组相比却开始逐渐下降，尤其是高剂量组与低剂量组相比差异极显著(p<0.01)；RT—PcR检测则显示氯丙嗪能引起Bcl-2、Bax、P53、FSHR mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值的增高、StAR mRNA表达水平的降低.与对照组比较，除低剂量组的Bax、FSHR mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2mRNA比值无明显改变外(p>0.05).其余各组均有统计学意义(p<0.01).此外，氯丙嗪在一定的浓度范围内(0.1μM～1μM)，能够促进P450scc和P450arom mRNA的表达.与对照组比较，除了低剂量组的P450scc mRNA表达水平无显著变化外(p>0.05)，其余各组均有统计学意义(p<0.05).当氧丙嗪浓度达到10μM时，P450scc和P450arommRNA的表达水平虽略有下降，但与1 μM的中剂量组比较并无明显差异(p>0.05)；FSHR免疫细胞化学染色是卵巢颗粒细胞的一种特异性染色，染色显示不同浓度的氯丙嗪均能够促进颗粒细胞FSHR的表达(p<0.05)，并呈现一定的剂量一效应关系。 结论：氯丙嗪可显著降低大鼠卵巢颗粒细胞活力、诱导颗拉细胞凋亡并影响细胞E2和P的分泌；氯丙嗪诱导的颗枉细胞凋亡与P53 mRNA表达水平以及Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值升高有关；stAR可能是氯丙嗪影响颗粒细胞激素分泌的重要关键因素之一。

邬静、袁慧、彭双清

展开 >

湖南农业大学动物医学院,长沙,410128 军事医学科学院疾病预防控制所,北京 100071

湖南农业大学动物医学院,长沙,410128

氯丙嗪 颗粒细胞 细胞活力 细胞凋亡 分泌功能

中国畜牧兽医学会

中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

2010-08-01

长春

中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会论文集

1691-1698

2010