摘要
脂肪酶是主要工业用酶制剂之一,在食品、洗涤剂和制药等领域广泛应用。本研究将编码米黑根毛霉(Rhizomucor miehe1)脂肪酶RML的基因克隆到pPIC9K载体中,构建了分泌型表达载体pPIC9K—RML,载体经线性化后转化Pichia pastoris GS115,G418梯度筛选获得了分泌表达RML的重组毕赤酵母工程菌,SDS-PAGE分析显示表达的脂肪酶分子量大小与预期一致。初步研究表明：重组脂肪酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0,以橄榄油为底物时,发酵上清液酶活最大可达102U／mL,表明构建的重组毕赤酵母工程菌具有较好的工业化生产潜力。
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