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热应激条件下巴马香猪PBMC内参基因的筛选

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目的：为了选择热应激条件下巴马香猪外周血单核细胞(PBMC)在体内较稳定的内参基因,为实时荧光定量PCR检测目的基因表达奠定基础.方法：本研究利用实时荧光定量PCR法检测了ACTB、GAPDH、TBP、B2M、RPL和18sRNA在热应激不同时段巴马香猪PBMC和体外培养的巴马香猪PBMC热打击后恢复9h的表达.结果：geNorm软件分析表明,体内热应激试验内参基因的稳定性从高至低依次为:ACTB/RPL＞ B2M＞ TBP＞ 18S＞ GAPDH.体外热打击恢复后PBMC中稳定性最高的基因为B2M和TBP,最低为GAPDH.NormFinder软件分析表明,在热应激的第ld、7d、14d和21d,最稳定的基因分别为RPL、TBP、RPL和B2M,最佳基因组合分别为ACTB+RPL、TBP+RPL、B2M+RPL和TBP+RPL.而体外稳定性最高的内参基因为ACTB,由高到低依次为TBP、RPL、B2M和GAPDH,最佳基因组合则为TBP+ACTB.结论：内参基因稳定性受处理条件影响,热应激条件下ACTB适合作为巴马香猪基因定量的内参基因.

Ju Xiang-hong、巨向红、Yong Yan-hong、雍艳红、Xu Han-jin、徐汉进、Jiao Pei-rong、焦培荣、Liao Ming、廖明

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Department of Veterinary Medicine, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China

The South China Agricultural University, Key Laboratory of Animal Disease Control and Prevention, Ministry of Agriculture

College of Veterinary Medicine,Guangzhou 510642, China

广东海洋大学动物医学系 广东 湛江524088

农业部动物疫病防控重点开放实验室 广东 广州510642

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兽医基础科学 巴马香猪 基因筛选 热应激

中国畜牧兽医学会

中国畜牧兽医学会第三届中国兽医临床大会

2012-08-01

兰州

中国畜牧兽医学会第三届中国兽医临床大会论文集

477-482

2012