在以往研究基础上本试验分别选取卵黄(15％和20％)、甘油(1％和1 5％)和OEP(OrvusEsPaste,氨基-钠-十二烷基硫酸脂)(0.5％和1％)两个较好的浓度与平衡时间(oh和2h)相互配伍来进行猪精液冷冻,表明:稀释液中添加15％NN黄、1％甘油和0.5％OEP,在甘油中平衡2h,可获得较高的活力和项体完整率;设定42℃(30s、40s、50s)、52℃(18s、25s、35s、45s)和60℃(20s、30s、40s)三个解冻温度,共分10个组别,检测冻后精子的活力和项体完整性(NAR),结果表明,解冻温度和对应的解冻时间对冻后精子的活力影响不明显,项体完整性却差异显著,以42℃40s组最佳;采用5mL大管冻后精液和新鲜精液进行体外受精(IVF)试验,无论是在卵裂率,还是桑椹胚或囊胚率上均不存在显著差异(P＞0.05);利用扫描电镜技术,研究5mL大管猪精液超低温冷冻前后精子的形态和超微结构;发现冻后精子的项体膜和质膜肿胀,大都呈泡状化,部分局部断裂,表明超低温冷冻和升温解冻对猪精子的膜结构有一定的损伤.
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