摘要
目的：探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对缺氧神经元的保护作用是否与激活自噬有关,其信号通路是否通过PI3K/Akt/mTOR/p70S6K途径.方法：1.建立皮质神经元缺氧(OD)损伤模型;CCK-8法确定BDNF对缺氧神经元的有效保护浓度及其最佳保护浓度.2.应用BDNF,Akt磷酸化抑制剂渥曼青霉素(MT),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别处理体外培养神经元,免疫印迹法观察磷酸化Akt(p-Akt),磷酸化mTOR(p-mTOR),磷酸化p70S6K(p-p70S6K)以及自噬微管相关蛋白轻链3-II(LC3II)的蛋白表达情况.结果：1.50ug/L BDNF可对缺氧神经元起保护作用(p＜0.05),100ug/L BDNF效应次之.2.BDNF和/或Rapamycin在下调p-Akt/p-mTOR/p-p70S6K表达的同时可上调LC3II的表达;当加入MT或3-MA后,BDNF下调p-Akt/p-mTOR/p-p70S6K的作用被阻,同时LC3II表达下降.结论：BDNF通过PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号途径激活自噬,发挥对缺氧神经元的保护作用.
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