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SIP-GAPDH融合基因的构建与原核表达

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利用重叠延伸(SOEing)PCR技术,将罗非鱼病源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株SIP基因与GAPDH基因通过Linker序列融合,构建成为SIP-GAPDH融合基因.经BamH I/SalI双酶切后,定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,在37℃,IPTG浓度为0.1mmol/L,诱导5h时蛋白表达量最大.Western Blot验证了pET-32a-SIP-GAPDH融合基因的蛋白分子量为102.01ku.SIP-GAPDH融合基因的成功构建与原核表达将为研制罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗提供理论依据.

LI Gui-huan、李桂欢、WANG Bei、王蓓、Lu Yi-shan、鲁义善、Tang Ju-feng、汤菊芬、Huang Yu-cong、黄郁葱、Wu Zahe、吴灶和、JIAN Ji-chang、简纪常

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Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, China

Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang, 524088, China

Guangdong Key Laboratory of Control for Diseases of Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China

广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088

广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东 湛江 524088

广东省水产经济动物病害控制重点实验室,广东 湛江 524088

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罗非鱼 无乳链球菌 融合基因 原核表达

广东海洋大学

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2013年环北部湾高校研究生海洋论坛

2013-10-01

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23-27

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