摘要
目的:制备大黄素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(EMD-PLGA NPs),观察形态、稳定性,测定粒径、包封率、载药量;探讨EMD-PLGA NPs对5/6肾切除大鼠残余肾组织的保护作用及可能机制.方法:第一部分:采用乳化-溶剂挥发法(Emulsion solvent evaporation method)制备EMD-PLGA NPs并按照正交设计优化处方,观察纳米粒的外观形态,激光粒度仪检测纳米粒的大小、分布及zeta电位,沉降法观察稳定性,测量EMD-PLGA NPs的吸光光度以计算包封率、载药量;第二部分:38只清洁级SD大鼠随机分为假手术组8只、造模组30只.造模成功24只,随机分为模型组8只(Model组)、大黄素组8只(EMD组)、纳米粒组8只(NPs组),期间检测大鼠24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr),观察肾组织病理变化,分别采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β1及结缔组织生长因子表达.结果:第一部分:得到最佳优化处方工艺条件，在最佳条件下制得EMD-PLGA NPs呈圆球状或椭圆状;粒径约(100±50)nm;分散体系的颗粒由上而下呈逐渐变淡的弥散分布，无明显的沉积物;包封率为(24.5±1.9)%，载药量为(18.9±3.4)%;第二部分:给药后2、4、6、8周，NPs组24h尿蛋白定量分别为(8.507±0.391)mg,(12.818±0.416)mg,(50.462±0.385)mg,(80.281±0.946)mg,与Model组、EMD组比较尿蛋白定量下降;给药后4、8周，与Model组、EMD组比较，NPs组血尿素氮(15.331±0.288)mmol/L,(19.273±0.339)mmol/L，血肌配(80.950±2.213)μmol/L,(100.470±2.813)μmol/L水平降低(P＜0.05);病理HE染色显示NPs组较Model组肾脏病理损害轻;免疫组织化学、RT-PCR结果显示，与Model组、EMD组比较，NPs组TGF-β1,CTGF在肾组织的表达差异具有统计学意义。结论:属国内外首次采用乳化一溶剂挥发法制备EMD-PLGA NPs，制备的EMD-PLGA NPs粒径小、分布均匀、载药率较高，药物吸光度及稳定性等均符合要求。为进一步制备组织靶向药物的研究奠定了基础;EMD-PLGA NPs较普通EMD降低尿蛋白定量、BUN, SCr效果好，并且能明显下调TGF-β1、CTGF的表达而抑制肾纤维化。
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