本研究对橡胶树品种海垦2游离小孢子培养体系进行初步研究,同时以小孢子为受体采用电击法尝试构建新的遗传转化体系,为进一步建立小孢子成熟的培养体系和新的遗传转化体系提供基础.试验结果表明小孢子的提取采用间接研磨法为佳,虽然工作效率低,但污染率低、杂质少、培养效果好.对小孢子进行不同的预处理试验,发现用Starvation Medium B预处理液预处理小孢子2d有利于小孢子分化.比较不周碳源的培养效果,发现麦芽糖较蔗糖培养效果好.对诱导培养基中的pH值、组分进行研究,发现诱导培养基pH值为6.6时,以改良N6为基本培养基添加外源激素2,4-D 0.5 mgL-1、KT 0.5 mgL-1诱导效果好,小孢子分化率达8.33％.小孢子的分化以B途径为主,初步获得小孢子分化的细胞团和微愈伤.以橡胶树小孢子为受体进行电激转化试验,发现小孢子经Starvation Medium B预处理液预处理2d后再进行电激处理,转化效果较好,瞬时表达结果证明外源基因已导入部分小孢子基因组中.
Ministry of Agriculture Key Laboratory for Tropical Crops Biotechnology Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China
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