摘要
目的:血管黏附分子的高水平表达是动脉粥样硬化病变炎症损伤的重要环节.血管细胞黏附分子(VCAM-1)作为重要的黏附分子之一,其表达上调不仅是血管内皮损伤的早期分子标志,而且其表达水平能够在一定程度上反映内皮炎性损伤的程度.本研究利用携VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡,采用超声造影成像动态观察这种靶向微气泡对不同病变阶段的动脉粥样硬化斑块特异分子表型的检测能力,探讨分子成像信号强度与VCAM-1表达以及炎性细胞损伤之间的关系. 方法:选取40只雄性载脂蛋白E(Apo E)基因敲除小鼠予以高脂饮食喂养作为年龄依赖性动脉粥样硬化动物模型,选用30只雄性正常饮食的C57BL/6J小鼠作为同龄对照组实验动物.实验动物在8、16、24、32周龄,采用携VCAM-1单克隆抗体靶向微气泡的分子超声造影成像定量评估小鼠近端升主动脉内VCAM-1的表达;小鼠经心脏灌注固定后,获取近端升主动脉组织分别行H&E染色与免疫组织化学染色,分析各周龄组小鼠血管内皮VCAM-1的表达以及单核/巨噬细胞浸润程度(Mac-2染色). 结果:高脂饮食喂养的Apo E基因敲除小鼠,其动脉粥样硬化病变呈年龄依赖性进展,8周龄时动脉内膜可见现散在的脂肪纹,至32周龄即可见广泛的动脉粥样硬化斑块形成;分子超声造影成像中,Apo E基因敲除小鼠近端升主动脉内靶向微气泡信号强度均显著高于同龄对照组小鼠,而且,自8周龄至32周龄组,Apo E基因敲除小鼠近端升主动脉内靶向微气泡信号强度逐渐增强,依次为3.44±0.39dB、5.02±1.31db、10.03±1.96db、23.9±3.9db,各组间具有统计学差异;免疫组织化学染色的结果与靶向微气泡信号强度具有相同的变化趋势,随着周龄的增加以及病变的进展,Apo E基因敲除小鼠近端升主动脉血管内皮表面VCAM-1染色以及单核/巨噬细胞浸润的范围逐渐增加,表明炎症损伤程度的进行性加重.在对照组动物实验中,各周龄组间C57BL/6J小鼠靶向微气泡信号强度及血管表面VCAM-1的表达、单核/巨噬细胞浸润均无显著性差异. 结论:高脂饮食喂养的Apo E基因敲除小鼠,其动脉粥样硬化病变的程度、血管内皮表面VCAM-1的表达以及单核/巨噬细胞浸润程度均随着周龄的增加而逐渐加重;应用携VCAM-1单克隆抗体微气泡的分子超声显像技术不仅能够实现活体内早期检测动脉粥样硬化病变特异性黏附分子的高水平表达,而且通过量化评估特异性黏附分子的表达水平,能够反映动脉粥样硬化病变炎症损伤的程度以及病变的进展.
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