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巨噬细胞特异人工miRNA表达载体的构建与鉴定

宋红芹 孙怀昌

巨噬细胞特异人工miRNA表达载体的构建与鉴定

宋红芹 1孙怀昌1
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作者信息

  • 1. 扬州大学兽医学院,禽类预防医学省部共建教育部重点实验室,江苏 扬州 225009
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摘要

构建巨噬细胞特异人工miRNA(amiRNA)表达载体pSRA-amiR,检测此载体在巨噬细胞内对靶基因表达的抑制效果.本实验中pSRA-amiRGFP对GFP表达的抑制效果低于pcDNAS-amiRGFP,其原因可能是,一方面,启动子SR-A的活性与CMV相比要弱得多,在本前期实验中SR-A驱动的GFP在多种细胞中的表达明显弱于CMV驱动的GFP在多种细胞中的表达就说明了这一点;另一方面pSRA-amiRGFP对GFP表达的抑制还受到转染效率的影响;其次载体中针对GFP的amiRNA为随机选择,未进行筛选。实验结果同时也显示载体pSRA-amiRGFP在非巨噬细胞PK-15中对GFP的表达无肉眼可见的抑制效果,而载体pcDN A5-amiRGFP则有明显的抑制效果,表明载体pSRA-amiR GFP对GFP表达的抑制具有巨噬细胞特异性。

关键词

巨噬细胞/特异人工信使核糖核酸/载体构建/靶基因表达/抑制效果

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主办单位

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会/中国病理生理学会动物病理生理专业委员会/宁夏医科大学/宁夏大学

会议名称

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

会议时间

2014-07-01

会议地点

银川

会议母体文献

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会论文集

页码

149-150

出版时间

2014
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