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番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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利用双生病毒简并引物PA/PB,对山东寿光保护地疑似感染番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)的番茄植株进行PCR检测,结果表明,番茄病叶由TYLCV侵染所致.从提取的病叶总DNA扩增到长约770bp的TYLCV外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因片段,克隆至pEASY-T1Simple载体,Xho I和EcoR I切下并插入到pET-32a,构建了TYLCV外壳蛋白基因原核表达载体,转入大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导获得了50kD重组蛋白,Ni2-NTA亲和层析纯化和Western印迹分析证明目的蛋白为TYLCV外壳蛋白,且具有良好的抗原活性.

LI Mei-qin、李美芹、QIAO Ning、乔宁、GUO Bao-tai、郭宝太、LIU Yong-guang、刘永光、PEI Hua-li、裴华丽、ZHU Xiao-ping、竺晓平

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Institute of Vegetables and Flowers,Weifang University of Science and Technology,Shouguang,Shandong 262700

潍坊科技学院蔬菜花卉研究所,山东寿光262700

College of Life Science,Qingdao Agriculture University,Qingdao,Shandong 266109

青岛农业大学生命科学学院,山东青岛266109

College of Plant Protection,Shandong Agricultural University,Taian,Shandong 271018

山东农业大学植保学院,山东泰安271018

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番茄 黄化曲叶病毒病 外壳蛋白 基因克隆 原核表达

中华农圣文化节领导小组

第三届中华农圣文化国际研讨会

2012-04-23

山东寿光

第三届中华农圣文化国际研讨会论文集

145-154

2012