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高产β-葡萄糖苷酶工程菌株的构建及其在2,6-二甲氧基对苯醌发酵制备中的应用

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构建高产β-葡萄糖苷酶的工程菌株并将其应用到2,6-二甲氧基对苯醌的发酵制备中.通过聚合酶链式反应从酿酒酵母CS1401的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶基因,并与载体pPICZαA连接后导入毕赤酵母X33中进行甲醇诱导表达;对表达成功的重组菌株进行β-葡萄糖苷酶活力测定;同时将酿酒酵母CS1401和重组菌株接种到小麦胚芽培养基中进行发酵并测定2,6-二甲氧基对苯醌的发酵产量.结果表明,酿酒酵母CS1401的β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母X33工程菌株中得到高效表达,酶活力达到4.5U/mL,为酿酒酵母CS1401的5倍;2,6-二甲氧基对苯醌的摇瓶发酵产量达到935.7μg/g,比酿酒酵母CS1401提高了0.4倍.因此,高产β-葡萄糖苷酶的重组工程菌株在2,6-二甲氧基对苯醌的发酵制备中具有一定的应用前景.

YI Xiaonan、易晓男、REN Qinghua、任清华、CHENG Wei、程炜、SUN Jiang、孙姜、QI Bin、齐斌、WANG Limei、王立梅

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College of Biological and Food Engineering, Changshu Institute of Technology, Changshu 215500, China

常熟理工学院生物与食品工程学院,江苏常熟 215500

Yantai Beer Tsingtao Asahi Co.Ltd., Yantai 264000, China

烟台啤酒青岛朝日有限公司,山东烟台 264000

Wuxi Ocean Engineering Equipment Co.Ltd.of Zhonghai Ocean, Wuxi 214000, China

中海海洋无锡海洋工程装备有限公司,江苏无锡 214000

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2,6-二甲氧基对苯醌 发酵工艺 β-葡萄糖苷酶 工程菌株

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