摘要
为了探讨羟基红花黄色素A对LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的抗炎机制,本研究通过体外分离、纯化和培养奶牛子宫内膜上皮细胞,采用MTT法筛选出HSYA的作用浓度,将奶牛子宫内膜上皮细胞分成对照组、LPS模型组、药物组包括高中低剂量组,分别采用ELISA法和荧光定量PCR法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1、IL-6、TLR-4的含量及细胞mRNA表达量,用Western blot检测MAPKs/NF-κB信号通路的关键蛋白p-IκBα、IκBα、p-p65和p65蛋白以及p-JNK、p-p38、p-ERK1/ERK2的表达变化.结果表明,研究发现HSYA(1-80pg/mL)浓度范围内对细胞无明显细胞毒性作用;5、20、80μg/mL的HSYA可抑制LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞的TLR4、IL-1、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平的,并呈浓度依赖关系.因此,在LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎性反应中,HSYA可通过控制IκB-α和p65的磷酸化,以及p38、JNK和ERK1/ERK2的磷酸化,抑制炎性细胞因子的表达.
NETL