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家蚕耐氟近等基因系SSH文库中碱性丝氨酸蛋白酶基因全长cDNA的克隆与表达特征分析

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在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一个差异表达的EST片段.以家蚕耐氟近等基因系群体的中肠为实验材料,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了该基因的全长cDNA(GenBank登录号:JX312360).生物信息学分析表明:该基因全长cDNA序列为868bp,包括20bp的5'-UTR和77bp的3'-UTR,开放阅读框(ORF)为771bp,编码256个氨基酸,分子量为27981.5,等电点为9.81.该基因由4个外显子和3个内含子组成,位于5号染色体上,编码的蛋白质为亲水性蛋白,序列分析表明该蛋白属于丝氨酸蛋白酶家族,在第17-18氨基酸残基处存在信号肽切割位点.该酶是以酶原的形式合成的,要切割掉6个氨基酸残基(18到24),该酶才有活性.RT-PCR结果显示:目的基因在中场、脂肪体及马氏管中都会表达,且中肠中,敏感个体的表达量是耐氟个体的1.42倍,脂肪体中,敏感个体的表达量和耐氟个体的差不多(1.17倍),马氏管中敏感个体的表达量是耐氟个体的8.16倍.

张华光、吴萍、刘娟、高丽、钱荷英、张月华、孙平江、王小强、徐安英

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江苏科技大学,江苏镇江 212003

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家蚕 耐氟近等基因 丝氨酸蛋白酶 基因克隆 基因表达

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江苏省昆虫学会第十三次会员代表大会暨学术研讨会

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