摘要
本文以铁皮石斛浙江临安野生种质C15为材料,结合转录组测序信息和铁皮石斛全基因组序列,设计DcWRKY10基因及启动子的扩增引物,通过PCR获得长1074bp的DcWRKY10基因序列和1384的上游调控序列.通过生物信息学,发现开放阅读框为843bp,共编码240个氨基酸残基,在氨基酸序列中含有WRKY保守结构域和C2H2锌指结构域,属于WRKY家族的第Ⅱ类成员.通过PlantCare分析Dc WRKY10的启动子序列,初步确定了该启动子的核心序列及茉莉酸甲酯、低温、逆境、昼夜控制及一系列光响应元件.利用实时荧光定量分析DcWRKY10在低温胁迫下铁皮石斛的表达差异,结果表明在铁皮石斛低温胁迫下DcWRKY10起着重要的调控作用,研究结果可为铁皮石斛抗寒新品种育种奠定理论基础.
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