目的:运用CRISR/Cas9技术敲除大鼠基因组中ALDH2基因片段,构建ALDH2基因敲除大鼠. 方法:根据ALDH2基因的外显子序列,设计一段sgRNA并合成.将sgRNA纯化后进行体外转录,取50μg/mLsgRNA和100μg/mL Cas9RNA混合,用显微注射仪将混合物注射到受精卵细胞胞质中.提取子代大鼠基因组DNA测序鉴定其基因型,基因型鉴定正确的大鼠与野生型交配后生出F1代杂合子大鼠,F1代互交后再筛选纯合子大鼠. 结果表明:测序结果显示,突变小鼠存在两种基因型,一种为12bp缺失突变,另一种为1bp插入突变. 结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建出ALDH2基因敲除大鼠.采用ALDH2大鼠构建酒精性肝病模型,能够提供更好的研究条件。