摘要
目的：在前期研究中,建立DMBA诱导的大鼠PanIN和胰腺癌模型,应用DIGE蛋白分析技术,动态检测胰腺癌发生过程中PanIN与早期胰腺癌组织中蛋白质的差异表达,从而发现RAP80在胰腺癌癌变过程中呈进行性升高,提示RAP80与胰腺癌的发生发展相关.拟进一步研究RAP80在胰腺癌中的表达和作用. 方法：采用免疫组化的方法,对胰腺癌组织进行RAP80表达情况的检测,应用RNA干扰技术沉默人胰腺癌细胞系SW1990RAP80基因的表达,慢病毒转染技术过表达胰腺癌细胞系SW1990RAP80基因;来探讨RAP80基因对胰腺癌细胞增殖、凋亡等生物学行为的影响,进一步研究RAP80在胰腺癌中的作用提供依据. 结果：人胰腺癌组织中RAP80的表达较人胰腺癌癌旁组织显著升高.静默RAP80基因和过表达RAP80基因对比研究发现,MTT法显示RAP80基因沉默后,SW1990细胞增殖能力显著下降,凋亡率明显升高;相反,当慢病毒介导RAP80转染SW1990细胞使RAP8基因过表达后,RAP80mRNA和蛋白水平明显升高;CCK-8法显示RAP80基因过表达后,SW1990细胞活力显著增高,凋亡率明显下降. 结论：我们的研究通过siRNA、慢病毒转染技术分别从抑制RAP80基因表达和过度表达RAP80基因两条途径入手,从两方面证实了RAP80基因可促进人胰腺癌细胞系SW1990增殖,增强肿瘤细胞活力,抑制胰腺癌细胞凋亡,因此提示RAP80基因在胰腺癌发生发展过程中,可能起重要的作用,但RAP80在肿瘤中所起的作用的机制有待于进一步的研究.
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