摘要
目的:探索糖皮质激素醋酸泼尼松龙治疗放射性肺炎的具体信号通路和作用机制. 方法:建立体外放射性肺炎细胞模型,通过电镜、Elisa、Western-blot等方法分别对自噬流、氧化损伤指标以及自噬调控相关蛋白进行检测. 结果:1.正常组与模型组MTT法检测的OD值相比均p＜0.05,差异具有统计学意义,运用激素干预后可以增强照射组细胞的增殖能力,与模型组相比p＜0.05,差异具有统计学意义;2.6Gy射线照射后,大鼠肺泡巨噬细胞DNA氧化损伤指标8-OHDG含量增高,运用醋酸泼尼松龙含药血清干预后6h、12h,各治疗组8-OHDG含量较模型组均有不同程度降低,且P值均小于0.05;3.6Gy射线照射后,大鼠肺泡巨噬细胞脂质氧化损伤指标MDA含量增高,运用醋酸泼尼松龙含药血清干预后6h、12h,各治疗组MDA含量较模型组均有不同程度降低,且p值均小于0.05;4.利用电镜扫描观察,可以发现照射组与正常组细胞内均有自噬小体的形成;5.照射后6h正常组与模型组相比,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值正常组高于模型组,p＜0.05,差异具有统计学意义;运用激素干预后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显高于模型组和正常组,且均为p＜0.05,差异有统计学意义;6.AMPK蛋白表达量,正常组低于模型组,p＜0.05,差异有统计学意义;激素组与模型组相比,表达量高于模型组,均为p＜0.05,差异有统计学意义;LKB1蛋白表达量,正常组高于模型组,p＜0.05,差异有统计学意义;激素组与模型组相比,表达量高于模型组,且p＜0.05,差异有统计学意义;ULK1蛋白表达量,模型组高于正常组,p＜0.05,差异具有统计学意义;激素组与模型组相比,表达量高于模型组,p＜0.05,差异具有统计学意义;m-TOR蛋白表达量,正常组与模型组相比,p＞0.05,差异没有统计学意义;激素组与模型组相比,表达量均低于模型组,p＜0.05,差异有统计学意义. 结论:①.放射性肺炎中肺实质细胞受到射线影响产生了氧化损伤并且发生了自噬;②.激素醋酸泼尼松龙可能通过上调细胞自噬水平减轻氧化应激损伤从而改善放射性肺炎;③.激素醋酸泼尼松龙上调自噬水平可能是通过激活AMPK通路而实现的.
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