摘要
以单壁碳纳米管(SWCNT)作为运输载体,构建锦鲤疱疹病毒(KHV)ORF149核酸疫苗.首先构建pcDNA3.1(+)-ORF149重组质粒,通过瞬时转染和免疫印迹分析确定其表达情况,最后通过1,3-偶极环加成反应法将重组质粒与SWCNTs进行偶联.结果表明,构建的重组质粒转染细胞后在免疫印迹分析和间接免疫荧光试验中均能检测到特异性信号,而空白对照组均无反应;在核酸琼脂糖凝胶电泳中,构建的重组疫苗电泳痕迹消失;在场发射扫描电镜观察下,与重组质粒进行偶联的 SWCNTs和空白SWCNTs形态差异明显.成功构建了单壁碳纳米管载KHVORF149新型核酸疫苗,为后续进行免疫效果研究奠定基础.