摘要
为确诊广东省阳江市存栏800头母猪某规模化猪场保育猪发病死亡的原因,本实验对该猪场发病猪采集的3份肺脏、肝脏、脾脏等临床样品进行细菌学检测及药敏实验和采用PCR/RT-PCR检测临床样品中伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)、圆环病毒3型(PCV3)和猪肺炎支原体等病原.对特异性扩增的3株PRRSV的ORF-5基因产物进行序列测定,与VR2332,HuN4,JXA1,CH-1a等代表毒株进行核苷酸序列相似性分析,并构建其遗传进化树.结果表明:细菌学检测分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌(HPS),分离鉴定的该株HPS对7种临床常用药,如阿莫西林,头孢拉定等均有较强的敏感性;PRRSV ORF-5基因相似性分析表明:3株PRRSV(LJW1、LJW2、LJW3)ORF-5核苷酸相似性为99.3％～99.8％,与美洲型代表毒株VR-2332核苷酸相似性为83.4％～83.7％,与欧洲型代表毒株Lelystad核昔酸相似性为64.2％～64.5％.其中与中国2007年流行较广的HP-PRRSV代表毒株JXA1核苷酸相似性为99.2％～99.5％,与HP-PRRSV毒株JXA1、HuN4、CH-1a、TJ核苷酸相似性较高,分别为99.2％～99.5％、99.0％～99.3％、94.5～94.9％、98.8％～99.5％;与中国河南和广西分离的HP-PRRSV毒株,HeNzm1-16和GXL205-2015核苷酸相似性最高,达99.7％.而与美洲型经典疫苗株MLV、美洲型标准株NC、美洲型经典株VR-2332核苷酸相似性较低,分别为88.5％～88.8％、85.2％～85.5％、82.3％～82.6％.PRRSV ORF-5基因系统进化树分析表明:3株PRRSV均属于美洲型毒株,与国内HP-PRRSV代表毒株JXA1、HuN4、TJ等处于同一分支,亲缘关系最近.本研究揭示了该场保育猪发病病原,并从分子水平明确了分离的3株PRRSV与不同代表毒株的亲缘关系,为弱毒疫苗的合理选择使用和综合防控PRRSV提供了实践依据.
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