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优化口腔唾液腺腺样囊性癌细胞3D混合基质胶培养
何俊舟 1刘婷姣2
作者信息
- 1. 大连医科大学口腔医学院
- 2. 大连医科大学口腔医学院,口腔组织病理教研室
- 折叠
摘要
目的:研究并优化口腔唾液腺腺样囊性癌(SACC)3D混合基质培养. 方法:1:提取SACC-LM,SACC-83细胞.2:混合凝胶配制,本实验混合基质胶采用Matrigel(BD)胶和Collange Ⅰ(BD)型胶原混合配置,简称(M-C)混合基质胶.3：细胞实验：SACC-LM，SACC-83 分别设置4 个浓度梯度，分别为第一组（M-C）混合基质胶，其中Collagen Ⅰ型胶原浓度为0.5mg/ml，Matrigel 体积为80%；第二组（M-C）混合基质胶，其中Collagen Ⅰ型胶原浓度为1mg/ml，Matrigel 体积为65%；第三组（M-C）混合基质胶，其中Collagen Ⅰ型胶原浓度为1.5mg/ml，Matrigel 胶体积为55%；第四组（M-C）混合基质胶，其中Collagen Ⅰ型胶原浓度为2mg/ml，Matrigel 胶体积为45%，每组4 个小皿，每间隔2-3 天更换一次培养液，饲养7 天后，4%多聚甲醛固定过夜，Hochest-3342d、Rh1-23、PI 染色，统计细胞死亡率。3：OCT 包埋制成冰冻切片后染E-钙粘蛋白抗体共聚焦显微镜观察细胞表达。 结果：1:显微镜下观察SACC-LM、SACC-83 细胞在四组（M-C）混合基质胶中均呈圆球状，整明细胞成球，在（M-C）混合基质胶中均成活且生长状态良好。2:四组（M-C）混合基质胶在分别培养7天后，Hochest-3342d、Rh1-23、PI 染色，统计细胞死亡率得知，第四组（M-C）混合基质胶，其中Collagen Ⅰ型胶原浓度为2mg/ml，Matrigel 胶体积为45%的细胞成活率最高可达到85%以上，可以得出结论，第四组（M-C）混合基质胶的浓度配比最为合适；共聚焦显微镜观察结果显示同样第四组（M-C）混合基质胶的E-钙粘蛋白表达结果最为理想，进一步证实上一结论。 结论:（M-C）混合基质胶的浓度，Collagen Ⅰ型胶原浓度为2mg/ml，Matrigel 胶体积为45%的配比最适合SACC-LM、SACC-83 的3D 培养。
关键词
唾液腺腺样囊性癌/混合基质胶/细胞培养/发病机制引用本文复制引用
主办单位
中华口腔医学会会议名称
中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十三次全国口腔病理学术会议会议时间
2019-10-01会议地点
昆明会议母体文献
中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十三次全国口腔病理学术会议论文集页码
5-6出版时间
2019