摘要
目的：发展一种简单、快速且高通量的病原菌检测与药敏检测的方法. 方法：利用普通的PCR扩增仪完成细菌孵育和基因组核酸提取;通过TaqMan qPCR在96孔PCR板内针对鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌特定基因保守碱基序列为靶标检测细菌;通过识别细菌与抗生素共同孵育以后目标细菌基因组核酸拷贝数变化进行耐药性检测. 结果：从细菌检测至耐药性结果报告,最快可以在4个半小时完成.对于25株鲍曼不动杆菌临床分离菌株、19株金黄色葡萄球菌临床分离菌株与23株铜绿假单胞菌临床分离菌株的检测结果一致性为100％(95％CI：86.68-100)、100％(95％CI：83.18-100)和100％(95％CI：85.69-100).针对鲍曼不动杆菌,环丙沙星与庆大霉素药敏检测一致性为100％(95％CI：86.68-100)与96％(95％CI：80.46-99.29);针对金黄色葡萄球菌,万古霉素与苯唑西林药敏检测一致性为94.74％(95％CI：75.37-99.07)与89.47％(95％CI：68.6-97.06);针对铜绿假单胞菌,环丙沙星与庆大霉素药敏检测一致性为100％(95％CI：85.69-100)与95.65％(95％CI：79.01-99.23). 结论：TaqMan qPCR与细胞培养相结合的方法可以实现病原菌及其耐药性的快速、高通量检测.
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