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忍冬AFLP技术体系的建立与优化

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目的:建立适于忍冬AFLP分析的技术体系.方法:采用改良CTAB法提取DNA,同时对AFLP分析中影响酶切、连接、预扩增、选择性扩增、电泳和银染过程的主要因素进行优化.结果:优化后的关键反应条件为:20 μL酶切反应体系含纯化后的DNA500ng,内切酶EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ各5U,37℃酶切6h;连接最适温度为16℃,连接10h或过夜:预扩增模板即连接产物的最佳用量为1 μL;预扩增产物的最佳稀释倍数为20倍.结论:本研究建立的反应体系重复性高、稳定性好,适用于忍冬基因组DNA的AFLP分析.

WANG Ting、王婷、ZHOU Feng-qin、周凤琴、LI Jia、李佳

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山东中医药大学,山东济南250355

济南市第二人民医院,山东济南250001

忍冬 AFLP标记 遗传多样性 种质资源

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2020-11-01

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