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基于Cycling探针的实时荧光聚合酶链式反应检测河鲀鱼中掺杂的横纹东方鲀成分

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目的:开发基于Cycling 探针实时荧光聚合酶链式反应(real-time fluorescent polymerase chain reaction,RT-PCR)用于检测河鲀鱼中横纹东方鲀(Takifugu oblongus,T.oblongus)成分. 方法:基于细胞色素C 氧化酶亚型I(cytochrome C oxidase subunit I,COI)基因为靶标设计RT-PCR 引物及Cycling 探针,开发横纹东方鲀成分检测方法,评价方法的特异性、扩增效率、灵敏度和稳定性. 结果:横纹东方鲀成分与密切相关的其他8种河鲀鱼、4种其他鱼类物种DNA 无交叉反应,具有很好的特异性; 方法扩增效率为93.47％; 方法重复18次均给出阳性报告的最小稀释点(limit of detection6,LOD6)为14.64pg/μL(相对应的质量含量为0.1％),95％置信水平条件下检出限为34.41pg/μL(11.59～119.05pg/μL,LOD95％),稳定性分析(P=0.152)表明该方法可转移到其他实验室以及在常规分析中使用. 结论:本研究开发的Cycling 探针RT-PCR 方法可对河鲀鱼食品中掺杂0.1％的横纹东方鲀成分进行可靠追溯.

LI Zhi-Ru、李治儒、WU Han、吴涵、YANG Li-Li、杨莉莉、ZHANG Xiao-Bo、张晓波、CAO Ji-Juan、曹际娟

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大连民族大学生命科学学院,生物技术与资源利用教育部重点实验室,大连 116600

河鲀鱼类食品 成分检测 横纹东方鲀 实时荧光聚合酶链式反应 Cycling探针

食品安全质量检测学报编辑部

第七届食品质量与安全学术研讨会

2023-08-02

哈尔滨

第七届食品质量与安全学术研讨会论文集

94-102

2023