摘要
肠杆菌科是目前畜禽养殖中重要的人畜共患病原菌,如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等.而氟喹诺酮类药物是治疗大肠杆菌感染最常用的药物.但是,随着其在临床上的广泛使用,导致细菌的耐药性已成为严重问题.尤其是质粒介导的喹诺酮耐药(plasmid-mediated-quin olone-resistance,PMQR)基因的传播引起了人们的重视. 目的:调查规模化猪场肠杆菌科细菌的耐药性,并探索大肠杆菌的喹诺酮耐药性oqxAB的传播特点,以期为规模化猪场的抗菌素类药物的使用和提示oqxAB基因和传播机制提供参考资料. 方法:从河南的某猪场采集猪粪便、工人粪便和周围环境(污水、灰尘、土壤)样品130份,通过LB肉汤培养基和麦康凯琼脂培养基分离肠杆菌科细菌,采用16S rRNA鉴定种属,琼脂二倍稀释法检测菌株对14种常用抗菌素的耐药性;PCR 扩增法鉴定喹诺酮耐药基因,从而筛选出 oqxAB阳性大肠杆菌,并采用PFGE法对其分型;以E.coli C600为受体菌进行接合转移实验,通过质粒的oqxAB基因扩增和染色体DNA的ERIC-PCR鉴定接合子. 结果:从130份样品中共分离筛选出202株肠杆菌科细菌,其中大肠杆菌168株,肺炎克雷伯菌23株,奇异变形杆菌11株.202株分离菌株对萘啶酸、对氨苄西林和磺磺胺甲噁唑/甲氧嘧啶耐药率高.耐药菌中大多数呈现多重耐药性(≥3种受试药物),肺炎克雷伯菌、大肠杆菌和奇异变形杆菌的多重耐药性比例分别为95.66％、66.66％和81.81％.喹诺酮耐药大肠杆菌中检测出了9种常见的耐药基因,oqxAB占比46.48％.携带oqxAB基因的33株大肠杆菌中,qxAB基因阳性大肠杆菌存在9个不同的PFGE谱型,其中C型的分布于来自种猪、仔猪、育肥猪和污水样品的oqxAB阳性大肠杆菌.接合实验经鉴定发现了13株接合子,并证明oqxAB基因位于质粒上. 结论:规模化猪场及周围环境中肺炎克雷伯菌、大肠杆菌和奇异变形杆菌具有较高的耐药率,携带oqxAB基因的大肠杆菌流行性较高,且遗传背景多样化,可能存在oqxAB基因的水平传播,也可能存在克隆传播.
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