摘要
本研究以体内外实验相结合的方法，探讨了大豆蛋白酶解物、酪蛋白酶解物对正常小鼠和免疫抑制小鼠细胞免疫、非特异性免疫和肠道免疫功能的影响。实验主要分为三个部分。 实验1以腹腔巨噬细胞吞噬功能为指标，通过四因素三水平正交试验，筛选了胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶水解大豆浓缩蛋白、大豆粕和酪蛋白的最佳水解条件。结果显示：大豆浓缩蛋白最佳酶解条件为枯草杆菌蛋白酶，底物浓度5.0％，酶与底物浓度比1.0％，pH=8.0，酶解时间150min。在此条件下，酶解液的多肽浓度为12.05mg·mL<'-1>，氨基氮浓度为16。26gmol·mL<'-1>。大豆粕的最佳酶解条件为木瓜蛋白酶，底物浓度5.0％，酶与底物浓度比4.0％，pH值=8.5，酶解时间30min。在此条件下，酶解液的多肽浓度为15.72mg·L<'-1>，氨基氮浓度为11.39μmol-mL<'-1>。酪蛋白的最佳酶解条件为胃蛋白酶，底物浓度5％，酶与底物浓度比4.0％，pH值为1.4，酶解时间15min。在此条件下，酶解液的多肽浓度为3.03mg·mL<'-1>，氨基氮的浓度为17.49μmol·mL<'-1>。 实验2选用96只小鼠，随机分为8组，分别为：灌胃生理盐水组(C)、灌胃大豆浓缩蛋白组(SC)、灌胃大豆粕组(SM)、灌胃酪蛋白组(Cs)、灌胃大豆浓缩蛋白的枯草杆菌蛋白酶酶解物组(ASC)、灌胃大豆粕的木瓜蛋白酶酶解物组(MSM)、灌胃酪蛋白的胃蛋白酶酶解物组(PCs)、灌胃生理盐水+注射环磷酰胺组(Cy)。结果显示：ASC对小鼠体增重、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶菌酶活性和小肠分泌型免疫球蛋白(sIgA)水平均没有显著影响；ASC组的脾脏乳酸脱氢酶(LDtH)和酸性磷酸酶(ACP)活性分别比C组提高了87.19％和44.73％(P<0.01)；ASC组血液白细胞数和脾脏ACP活性分别比SC组提高了23.91％和24.35％(P＜0.05)；MSM组愎腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏LDH和ACP活性、血清溶茵酶活性和肠道slgA水平分别比SM组提高了255.42％、40.89％、27.05％、46.15％和27.78％(P＜0.05)；MSM组体增重、血液白细胞数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏LDH和ACP活性及肠道slgA水平分别比C组提高了57.49％、28.57％(P＜0.05)、278.21％、97.25％、51.27％(P＜0.01)和33.25％(P＜0.05)。PCs对小肠sIgA水平无显著影响；PCs组脾脏系数·、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏LDH和ACP活性分别比Cs组提高了22．33％、116．67％、牾．30％和25．58％(尸＜0.01)；PCs组体增重、脾脏系数、胸腺系数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏LDH和ACP活性分别比C组提高了64.44％、19.71％、34.16％(P＜0.05)、350％、123.91％和56.75％(P<0.01)。结果表明，酪蛋白酶解物具有显著促进脾脏和胸腺生长的作用，大豆浓缩蛋白酶解物具有显著增加小鼠血清白细胞数的作用，主要是增加了血液中的淋巴细胞数，大豆粕和酪蛋白酶解物显著地促进腹腔巨噬细胞的吞噬功能，提高脾脏的LDH酶、ACP酶和血清溶茵酶活性。大豆粕酶解物还可显著提高小肠sIgA水平，酪蛋白酶解物的作用效果不如大豆粕。 实验3为了探讨大豆蛋白酶解物和酪蛋白酶解物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响，以环磷酰胺造成免疫抑制小鼠模型，选用96只小鼠，随机分为8组，分别为：灌胃生理盐水组(C)、灌胃大豆浓缩蛋白组(SC)、灌胃大豆粕组(SM)、灌胃酪蛋白组(Cs)、灌胃大豆浓缩蛋白的枯草杆菌蛋白酶组(ASC)、灌胃大豆粕的木瓜蛋白酶酶解物组(MSM)、灌胃酪蛋白的胃蛋白酶酶解物组(Pcs)、灌胃生理盐水的正常对照组(N)。结果显示：ASC与SC相比能显著提高小鼠胸腺系数(P<0.01)，但对脾脏系数无显著影响；与C组相比，ASC组的体增重、血液白细胞数、脾脏AcP活性、血清溶菌酶活性和小肠sIgA水平分别提高了57.23％(P<0.05)、96.77％、25.36％、55.17％(P<0.01)和75.90％(P<0.05)；MSM组对小鼠的体增重、脾脏和胸腺系数均无显著影响；与SM组相比，MSM组脾脏ACP活性、血清溶菌酶活性和小肠sIgA水平分别提高了10.72％(P<0.05)、45.56％(P<0.01)和79.22％(P<0.05)；与C组相比，MsM组血液白细胞数、脾脏ACP活性、血清溶菌酶活性和小肠sIgA水平分别提高了109.68％(P<0.01)、18.44％(P<0.05)、80.69％(P<0.01)和83.53％(P<0.05)。与C组相比，PCs组小鼠体增重、胸腺系数、脾脏ACP活性、血清溶菌酶和小肠sIgA水平分别提高了71.68％、60.42％(P<0.05)、24.32％、76.55％和82.73％(P<0.01)；与Cs组相比，PCs组血清溶茵酶和小肠sIgA水平分别提高了41.44％P＜0.01)和66.06％(P＜0.05)．结果表明，大豆蛋白酶解物和酪蛋白酶解物对免疫抑制小鼠免疫功能的恢复均有促进作用。
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