摘要
本文论述了银杏叶提取物对视网膜节细胞的保护作用，全文分为两部分： 第一部分EGb76l对视神经夹伤模型RGC的保护作用。 第一节大鼠视神经夹伤模型的建立。 研究目的：建立正常大鼠视神经夹伤模型。 研究材料与方法：实验用SPF级SD大鼠18只，右眼为视神经夹伤眼，于球后2mm用40g微型视神经夹夹持视神经60秒，左眼未做夹持，作为正常对照眼。28天后行动物安死术，术前5天用3％荧光金双上丘注射，逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜定向铺片，在荧光显微镜下距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片，分别代表上下左右四个象限的RGC数量，利用计算机图像分析系统做RGC计数，计算节细胞存活率。 研究结果：左眼单位面积(4张照片的面积)RGC数量平均461±58，右眼RGC单位面积(4张照片的面积)RGC数量平均278±44。双眼RGC单位面积数量进行比较(P<0.05)，结果有显著性差异，损伤眼的RGC单位面积数量明显低于正常眼的RGC单位面积数量。大鼠RGC存活率在50.21％～74.2l％之间，平均为60.59％±8.78％。左眼上下左右4张照片RGC平均值分别为114、112、116和119，经方差分析各组间无显著性差异。右眼上下左右4张照片RGC数平均值分别为73、71、65和68，各组之间无显著性差异，视神经夹伤并不特定的使某个象限的RGC更多丢失。 研究结论：本实验模型较稳定可靠，可造成RGC的稳定丢失。 第二节EGb76l对视神经夹伤模型RGC的保护作用。 研究目的：初步探讨EGb761对视神经夹伤后RGC的保护作用。 研究材料与方法：实验用SD大鼠90只分为5组，分别为阴性对照组、阳性对照组、低剂量用药组、中剂量用药组和高剂量用药组，每组各18只。大鼠右眼为损伤眼，于球后2mm用40g微型视神经夹夹持视神经60秒，左眼未做夹持，作为正常对照。阳性对照组给予1％灯盏细辛5ml/kg，低剂量用药组给予0.25％EGb761.5m1/kg，中剂量用药组给予1％EGb761 5ml/kg，高剂量用药组给予4％EGb761 5ml/kg。实验持续时间为28天。动物安死术前5天用3％荧光金双上丘注射，逆行标记视网膜神经节细胞，做视网膜铺片，图像分析。 研究结果：阴性对照组、阳性对照组、低剂量用药组、中剂量用药组和高剂量用药组节细胞存活率分别为60.59％，73.80％、66.49％和71.60％和74.17％。阴性对照组的节细胞存活率与其它各组之间均存在显著性差异(P<0.05)，中、高剂量用药组与低剂量用药组之间存在显著性差异(P<0.05)，而高剂量用药组与中剂量用药组之间未见显著性差异(P>0.05)，中高剂量组与阳性对照组比较无显著性差异。随着EGb761给药剂量的增加，节细胞的保护作用随之增强，有很好的量效关系。 研究结论：在视神经夹伤模型中，EGb761能有效地保护视网膜神经节细胞，与阳性对照药灯盏细辛比较，保护节细胞的效果两者接近。 第二部分EGb76l对急性高眼压模型RGC的保护作用。 第一节大鼠急性高眼压模型的建立。 研究目的：建立大鼠急性高眼压模型。 研究方法：实验用SPF级SD大鼠18只，右眼为损伤眼，分别行前房穿刺灌注形成110mmHg(15.96Kpa)的眼压，维持60分钟，左眼未做，作为正常对照眼。28天后行动物安死术，术前5天用3％荧光金双上丘注射，逆行标记视网膜节细胞。做视网膜定向铺片，在荧光显微镜下距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄4张照片，分别代表上下左右四个象限的RGC数量，利用计算机图像分析系统做RGC计数，计算RGC单位面积(4张照片)数量及存活率。 研究结果：双眼RGC单位面积数量进行比较，结果有显著性差异(P<0.05)，损伤眼的RGC单位面积数量明显低于正常眼的RGC单位面积数量。右眼RGC单位面积数量平均为511±39；左眼RGC单位面积数量平均为～343±52。无论正常眼、还是损伤眼RGC在各象限的分布比较均匀，各组之间无显著性差异。大鼠RGC存活率在59.23％～76.58％，平均66.97％±7.14％。急性高眼压模型并不特定的使某个象限的RGC更多丢失。 研究结论：本实验模型较稳定可靠，可造成RGC的稳定丢失。 第二节EGb761对急性高眼压模型RGC的保护作用。 研究目的：研究急性高眼压模型中，EGb761对视网膜神经节细胞的保护作用，并观察用药剂量与保护效果之间的关系。 研究方法：实验用SD大鼠90只分为5组，分别为阴性对照组、阳性对照组、低剂量用药组、中剂量用药组和高剂量用药组，每组各18只。大鼠右眼为损伤眼，分别行前房穿刺灌注形成110mmHg(14.63Kpa)的眼压维持60分钟，左眼未做损伤，作为正常对照。阴性对照组于损伤后2小时及此后每日腹腔分别灌胃生理盐水5ml／kg。按这种给药方法，阳性对照组给予1％灯盏细辛5ml／kg，低剂量用药组给予0.25％EGb761 5ml／kg，中剂量用药组给予1%EGb761 5ml／kg，高剂量用药组4％EGb761 5ml／kg，实验持续时间为28天。动物安死术前5天用3％荧光金双上丘注射，逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜定向铺片，距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片。利用彩色颗粒分析软件(CPAS)做节细胞计数，计算各组节细胞的存活率并做统计分析。 研究结果：阴性对照组、阳性对照组、低、中、高剂量用药组节细胞存活率分别为66.97％、73.75％、75.14％、78.30％、81.36％。阴性对照组的节细胞存活率与其它各组之间均存在显著性差异(P(0.05)，阳性对照组与高剂量用药组存在显著性差异(P(0.05)、与低中剂量组之间无显著性差异(P>0.05)。高剂量用药组与低剂量用药组之间存在显著性差异(P=0.0458)，而高剂量用药组与中剂量用药组之间未见显著性差异(P=0.3595)，随着EGb761给药剂量的增加，节细胞的保护作用随之增强。 研究结论：在急性高眼压模型中，EGb761能有效地保护视网膜节细胞，与阳性对照药灯盏细辛比较，保护节细胞的效果两者接近。
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