摘要
本研究应用荧光多重PCR和Genescan方法研究中国人结直肠癌患者MSI变异情况和临床特征，以及黄芩、穿心莲等中药对错配修复基因突变表型的影响，为中国人MSI结直肠癌遴选、发生机理和中药治疗的研究提供依据。第一部分中国人结直肠癌微卫星不稳定性研究目的 研究中国人结直肠癌MSI变异情况和MSI结直肠癌的临床病理生物学特征。 方法 应用荧光多重PCR结合Genescan方法在105例结直肠癌初诊患者中检测5个微卫星位点，筛选MSI结直肠癌。分析MSI结直肠癌潜在的相关临床病理生物学特征，包括肿瘤诊断年龄、性别、位置、病理性质、组织分化程度、淋巴结转移情况(0、1-3、≥4)。 结果105结直肠癌中，MSI检出率24.7％，其中MSI-H14例(13.3％)，MSI-L12例(11.4％)；队列中各位点突变率分别是D5S346(5.7％)、BAT26(8.6％)、BAT25(10.5％)、D17S250(8.6％)、D2S123(10.5％)；MSI检出频率在低年组(31.8％)和高年组(26.2％)高于中位年龄组(19.5％)；结肠癌患者(34.2％)MSI检出率明显高于直肠癌患者(19.4％)；粘液腺癌组(33.3％)MSI检出率高于腺癌组(22.6％)：低分化组(38.2％)中MSI检出频率明显高于中分化组(18.2％)与高分化组(18.8％)：MSI结直肠癌中淋巴结转移为15.3％，MSS结直肠癌淋巴结转移为29.15％。MSI结直肠癌的组织分化程度与淋巴结转移情况与MSS结直肠癌有显著的统计学差异(P<0.05)，而年龄、肿瘤位置、病理性质与MSI检出率无显著临床意义(P>0.05)。 结论 中国人MSI结直肠癌检出率为24.％；MSI结直肠癌有其独特的临床生物学特征，具有低分化癌多见，淋巴结转移少等特点，淋巴结转移少可能是MSI结直肠癌具有生存优势的原因之一。第二部分 黄芩等中药对错配修复基因缺失结肠LoVo细胞的作用研究[摘要]目的 研究黄芩、穿心莲诱导错配修复基因hMSH2缺失的结肠LoVo细胞凋亡作用，观察中药对MSI表型的影响，探讨黄芩、穿心莲对LoVo细胞的作用机理。方法采用体外培养技术、TUNEL法观察细胞凋亡率、变性凝胶电泳检测微卫星标志BAT-25、D2S123状况。 结果黄芩、穿心莲、阿斯匹林均能诱导LoVo细胞和HCT-8细胞凋亡，与对照组有显著差异(p<0.001)：阳性细胞标志指数视不同的药物而存在较大的差异，黄芩对结肠LoVo细胞的诱导凋亡作用较穿心莲强(p<0.01)，其作用时间在96h达到高峰，与时间不呈依赖关系；相同浓度黄芩作用于LoVo细胞较HCT-8细胞强，两组细胞间存在显著差异(p<0.01)。穿心莲诱导结肠HCT-8细胞凋亡的作用较黄芩和阿斯匹林强(p<0.01)，且呈时间依赖，一周时全部细胞凋亡，与相同浓度的穿心莲作用于LoVo细胞相比存在显著差异(p<0.01)。LoV0细胞表现为MSI，HCT-8细胞表现为MSS，黄芩、穿心莲对两组细胞的微卫星状态没有影响。 结论 黄芩、穿心莲能够诱导Lovo细胞和HCT-8细胞凋亡，但黄芩对错配修复基因缺失的Lovo细胞作用更强。黄芩和穿心莲对LoVo细胞的BAT-25、D2S123微卫星状态无影响。
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