摘要
目前，肿瘤严重危害着人类健康，从天然植物中寻找安全、有效的抗肿瘤药物，在世界上已经成为抗肿瘤药物研究的一个重要组成部分。 青天葵来源于兰科植物毛唇芋兰Nerviliae Fordii(Hance)Schltr的地下块茎和全草。具有润肺止咳，清热解毒，散淤止痛等作用。主治肺痨咯血，肺热咳嗽，口腔炎，咽喉肿痛，疮疡肿毒，跌打损伤。在现代研究中，青天葵对治疗鼻咽癌有一定的缓解作用。但青天葵化学成分及药理研究未见报道，其抗癌作用是否可靠尚需进一步验证。 化学成分预试验结果表明，青天葵主要含三萜、甾体、有机酸、氨基酸、黄酮等成分。 本课题首次对青天葵进行醇提和部位分离，对其石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和甲醇提取物采用MTT法测定了它们各自对白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NG108-15、人肝癌细胞株Hele7404的生长抑制情况。结果表明，青天葵石油醚提取物和乙酸乙酯提取物具有一定的体外抗肿瘤作用。对体外初步筛选出的活性部位，进行了小鼠最大耐受量(MTD)试验，用药前后，小鼠无异常表现，小鼠对石油醚提取物的最大耐受量为18.0g／kg，对乙酸乙酯提取物的最大耐受量为14.4g／kg。对体外初步筛选出的活性部位，又利用S<，180>和H<，22>小鼠模型进行了体内抗肿瘤试验。体内试验结果表明，石油醚提取物和乙酸乙酯提取物对小鼠移植性肉瘤S<，180>和小鼠肝癌H22均有明显的抑瘤活性，并且对H<，22>荷瘤小鼠可延长其生存期。它们也能改善小鼠的免疫机能。 对体外体内筛选出的活性部位，采用柱色谱方法进一步进行系统的化学成分分离和纯化，对纯净的化合物利用熔点测定、UV、IR、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR等方法进行结构鉴定。本课题首次从青天葵石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分离得到12个化合物，鉴定了其中11个化合物，它们分别为：Cyclohomonervilol(Ⅰ)、二十八烷酸(Octacosanoic a c i d，Ⅱ)、豆甾醇(Stigmasterol，Ⅲ)、Cyclohomonervilol-(E)-p-hydroxy cinnamate(Ⅳ)、24(R／a)-dihydrocycloeucalenol-(E)-p-hydroxy cinnamate(V)、十六烷酸(Doeosanoic acid，Ⅵ)、24(S/β)-dihydrocycloeucalen01-(E)-p-hydroxy cinnamate(Ⅷ)、山奈酚-7-甲醚(Kaempferol-7-methyl ether，IX)、槲皮素-7，3’-二甲醚(quercetin一7，3＇－dimetＨylether，X)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol，Ⅺ)、正亮氨酸(Norleucine，XII)。 本课题首次对分离出的山奈酚-7-甲醚和槲皮素-7，3＇-二甲醚进行了体外抗肿瘤试验，采用MTT法测定了它们各自对白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NG108-15、人肝癌细胞株Hele7404的生长抑制情况。结果表明，山奈酚-7-甲醚具有一定的体外抗肿瘤作用，因而初步确定山奈酚-7-甲醚为青天葵抗肿瘤的活性成分之一。但槲皮素-7，3＇-二甲醚基本无抗肿瘤作用。 本课题首次采用HPLC方法测定了山奈酚-7-甲醚和槲皮素-7，3＇-二甲醚在青天葵药材中的含量。结果表明，山奈酚-7-甲醚在青天葵中的含量为0.0787％，槲皮素-7，3＇-二甲醚在青天葵中的含量为1.1198％ 本课题首次确定了青天葵的石油醚提取物和乙酸乙酯提取物具有抗肿瘤作用，并从中分离鉴定了11个化合物，同时初步揭示了山奈酚-7-甲醚为青天葵抗肿瘤的活性成分之一。本课题对有活性的山奈酚-7-甲醚及量比较大的槲皮素-7，3＇-二甲醚进行了含量测定。本课题为最终揭示青天葵抗肿瘤作用及其物质基础，建立药材质量的科学评价方法，实现药材可持续开发利用及抗肿瘤中药新药开发提供了科学依据。
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